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    聚丙烯酰胺凝膠電泳

    點擊次數:   更新時間:20/03/10 16:17:03     來源:www.hnyrdjd.com關閉分    享:
      聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE,是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術。

      幾乎所有蛋白質電泳分析都在聚丙烯酰胺凝膠上進行,而所用條件總要確保蛋白質解離成單個多肽亞基并盡可能減少其相互間的聚集。



      作用原理:聚丙烯酰胺凝膠為網狀結構,具有分子篩效應。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和SDS-聚丙烯酰胺凝膠;非變性聚丙烯酰胺凝膠,在電泳的過程中,蛋白質能夠保持完整狀態,并依據蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。
      聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE根據其有無濃縮效應,分為連續系統和不連續系統兩大類。
      連續系統電泳體系中緩沖液pH值及凝膠濃度相同,帶電顆粒在電場作用下,主要靠電荷和分子篩效應。
      不連續系統中由于緩沖液離子成分,pH,凝膠濃度及電位梯度的不連續性,帶電顆粒在電場中泳動不僅有電荷效應,分子篩效應,還具有濃縮效應,因而其分離條帶清晰度及分辨率均較前者佳。不連續體系由電極緩沖液、濃縮膠及分離膠所組成。濃縮膠是由AP催化聚合而成的大孔膠,凝膠緩沖液為pH6.7的Tris-HCl。分離膠是由AP催化聚合而成的小孔膠,凝膠緩沖液為pH8.9Tris-HCl。電極緩沖液是pH8.3Tris-甘氨酸緩沖液。2種孔徑的凝膠、2種緩沖體系、3種pH值使不連續體系形成了凝膠孔徑、pH值、緩沖液離子成分的不連續性,這是樣品濃縮的主要因素。
      小編:wxy

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